Таблица соответствия хроматографических колонок

Каждая компания даёт свои наименования, но неподвижные фазы используют одни и те же. Возможны небольшие различия в типах сшивки полимера и обработки поверхности кварца.

Подскажите пожалуйста есть ли у кого в наличие или может быть где то в интернете есть (никак не могу найти) информация по соответствию хроматографических колонок различных фирм производителей. Например ZB-1 соответствует HP-1 и т.д. Есть ли, к примеру, какая то сводная таблица?

kak-iskat.ru/?q=%D1%82%D0%B0%D0%B1%D0%BB%D0%B8%D1%86%D0%B0+%D1%81%D0%BE%D0%BE%D1%82%D0%B2%D0%B5%D1%82%D1%81%D1%82%D0%B2%D0%B8%D1%8F+%D0%BA%D0%BE%D0%BB%D0%BE%D0%BD%D0%BE%D0%BA+%D0%92%D0%AD%D0%96%D0%A5

Sky Zero пишет:
Очень благодарен за ответы. Особенно понравился ответ МХ.
И, кстати, МХ я умею пользоваться поиском и считаю, что могу найти практически любую книгу в интернете если таковая присутствует в сети. Если кому нужно обращайтесь — всегда рад чем то помочь коллегам. И я думаю, что даже те люди, которые отвечали на мой вопрос, почерпнули новые ссылки. Я тоже.

Ай как харашо!
Прости, милая, что помешали
в другой раз знать будем, что сама всё можешь, а здесь спрашиваешь, дабы не забыть, что хотела

Ай как харашо!
Прости, милая, что помешали
в другой раз знать будем, что сама всё можешь, а здесь спрашиваешь, дабы не забыть, что хотела

Ни одной из этих ссылок у меня не было. Ответы мне помогли. Что же вызвало такой бурный сарказм? Может быть для Вас, господин Апраксин (VIP member), стоило такого большого труда их разместить. Ну оно и понятно — Вы же VIP. Учтем на будущее.

И, к вашему сведению, я мужского пола и свами в браке не состою чтобы меня милой называть. Чтож. Россия велика. у каждого свои наклонности

За ссылки все равно благодарен Они мне действительно помогли

Sky Zero пишет:
Ни одной из этих ссылок у меня не было. Ответы мне помогли.

Sky Zero пишет:
Что же вызвало такой бурный сарказм?

как раз сарказм был в Вашем сообщении, что и вызвало соответствующий ответ.
а по-поводу половой принадлежности. Ну извините, ну не видно из Вашего «ника» таковой , а Россия велика, всех не упомнишь.

to Sky Zero:
Мне кажется, вот это вполне может вызвать сарказм:

. я умею пользоваться поиском. может быть где то в интернете есть (никак не могу найти)

Sky Zero пишет:
И я думаю, что даже те люди, которые отвечали на мой вопрос, почерпнули новые ссылки.

Надеюсь, вы (и не только вы) почерпнете из этой темы новые знания, а не новые ссылки. Это важнее.

Апраксин пишет:
а по-поводу половой принадлежности. Ну извините, ну не видно из Вашего «ника» таковой

Sky Zero пишет:
всегда рад чем-то помочь коллегам

Апраксин пишет:
а по-поводу половой принадлежности. Ну извините, ну не видно из Вашего «ника» таковой

Sky Zero пишет:
всегда рад чем-то помочь коллегам

Можно много чего заметить! Это еще кроме как ответить, надо прочитать все сообщения данного пользователя с целю поиска глагола, употребленного в соотвестствующей форме?
Если попытаться собрать имена форума в кучку, то кроме Лидии и Анны Александровны (хорошо бы еще и Вероника была Вероникой, а то плохо запоминается написание), практически все девушки форума предпочитают пользоваться либо безродными «никами» либо омужествленными (если не считать однодневных «Катюшь», как говорит г-н Костиков). Большая же часть мужских «ников» вполне идентифицируема (нуу, процентов на 70, наврное), даже если и не являются бездарно списанными с паспорта.
Соответственно, если имеем «радостное солнце» «светлое счастье» или т.п., то высока вероятность, что оппанентом является девушка.
Дасс, чистый флуд.

Ответов в этой теме: 12
Страница: 1 2
«« назад || далее »»

Источник

Квалификация аналитических колонок

Размер

Добавлен

Скачиваний

Добавил

Предмет

Тип работы

Факультет

КВАЛИФИКАЦИЯ АНАЛИТИЧЕСКИХ КОЛОНОК

В настоящем документе излагаются общие принципы квалификации аналитических колонок, используемых в лабораториях OMCL. Было решено, что аналитические колонки относятся к категории реактивов , но также являются неотъемлемой частью оборудования для хроматографии (Евр. Фарм. , статьи № 2.2.28 и 2.2.29). От них могут зависеть получаемые результаты (ISO/IEC 17025:2017, глава 6.4 «Оборудование» , пункт 6.4.1).

По этой причине следует проводить квалификаци ю аналитических колонок , когда в OMCL считают, что это необходимо.

Это обязанность OMCL о предел ить соответствующее расписани е квалификаци и на протяжении срока использования колонки, например, в зависимости, от цели и частоты ее применения.

2. СФЕРА ПРИМЕНЕНИЯ ДОКУМЕНТА

В этом документе описаны требования и общие критерии, относящиеся к квалификации аналитических колонок, используемых для жидкостной хроматографии ( ЖХ ) и газовой хроматографии ( ГХ ) .

Это руководство может использоваться в OMCL при планировании, проведении и документировании процесса кв алификации с момента получения колонки и на протяжении всего ее жизненного цикла.

Примеры методик , которые приводятся в приложениях 1 и 2, носят необязательный характер. Они могут быть полезными при проведении требуемой квалификации. Тем не менее, авторы руководства оставляют выбор процедуры, наиболее подходящей , чтобы подтвердить, что аналитические колонки подходят для запланированного применения, на профессиональное суждение и имеющийся опыт специалистов каждой из OMCL .

3. ГЛОССАРИЙ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Т ерминология в данном документ е с оответству ет используемой в статье №2.2.46 Европейской фармакопеи «Методики хроматографического разделения».

4. ВОПРОСЫ КВАЛИФИКАЦИИ НЕПОСРЕДСТВЕННО ПОСЛЕ ПРИОБРЕТЕНИЯ

Поступающие колонки обязательно проверить на предмет появления физических повреждений при перевозке, соответствия закупочной ведомости, а также комплектности документации.

В OMCL должны хранить записи, имеющие отношение к организации работы с колонками , для применимых требований, описанных в статье 6.4.13 ISO 17025:2017.

5. ПЕРВОНАЧАЛЬНАЯ КВАЛИФИКАЦИЯ

Аналитическую колонку можно надлежащим образом проверить перед использованием в лаборатории OMCL, руководствуясь предварительно определенной методик ой. Это можно делать при получении или, самое позднее, перед первым использованием.

Если первоначальная квалификация проводится, то е е следует задокументировать в соответствующем отчете о квалификации ( включа ет, например, дату квалификации, ссылку на методику квалификации, указание использованных материалов и реактивов сравнения, результаты, список задействованного хроматографического оборудования, заключение , успешно ли колонка прошла квалификацию , и т.д. ). Этот отчет можно использовать при подаче жалоб в случае несоответствия колонок спецификации производителя.

Проверка производительности колонок может осуществляться с помощью одного или нескольких из нижеследующих подходов:

а) П роверк а колонки в тех же условиях, что указаны в брошюре по контрол ю к ачества от производителя. Надо проверить те же параметры, а результаты сравнить с результатами производителя. В качестве альтернативы для тестирования могут использоваться другие испытуемые смеси.

б ) Если колонка будет использоваться только для конкретных методов испытаний, может быть целесообразным выполн ение квалификаци и с помощью соответствующей специфичной для методики испытания проверки пригодности хроматографической системы.

в ) Или же для испыт ания может использоваться обычная смесь / методик а для колонок с аналогичными неподвижными фазами.

За выбор надлежащих параметров качества и соответствующих им критериев приемлемости отвечает лаборатория OMCL. Выбранные параметры и критерии должны подходить для предполагаемого использования колонки. Они могут включать разрешающую способность, коэффициент асимметрии, число теоретических тарелок и т.д. Примеры приводятся в приложениях 1 и 2 .

6. ПЕРИОДИЧЕСКАЯ КВАЛИФИКАЦИЯ

Квалификацию колонок можно выполнять периодически с помощью одних и тех же соединений /процедур . В лаборатории следует вести систематическую запись результатов квалификации.

Методик а квалификации

Для периодической квалификации можно применять минимум одну из методик , выбранных для первоначальной квалификации. Первая хроматограмма , полученная в лаборатории с помощью новой колонки, может служить ориентиром эффективности работы колонки в начальный момент времени в лаборатории OMCL. Ее можно использовать в качестве образца сравнения для последующих проверок. И з-за разницы конфигураций оборудования для ГХ и ЖК (например, в мертвом объеме) , условий работы, электроники системы и т.д. могут быть получены немного разли чающиеся хроматограмм ы. Такие вариации могут быть учтены в критериях приемлемости, которые устанавливаются на месте .

Сотрудникам лаборатории следует определять и документировать частоту проведения квалификации в зависимости от использования колонки (например, в штатном режиме или «точечно») . Например, квалификация согласно разделу 5 (см. выше) может выполняться на основании фиксированных интервалов времени (например , один раз в год) или на основании объемов использования колонки, например , после определенного количества введенных проб.

Запись результатов квалификации среды

Запись результатов квалификации помогает пользователю отслеживать изменения производительност и колонки с течением времени и принимать информ ированное решение о прекращении ее использования . Колонку следует заменять каждый раз, когда ее фактическая производительность оказывается ниже ожидаемой.

7. КВАЛИФИКАЦИЯ В ПРОЦЕССЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

Квалификация в процессе использования соответствует испытанию на пригодность системы, описанному в отдельной методике испытаний. Это испытание обязательно проводить на регулярной основе перед каждым испытанием и/или во время серии вводов испытуемого вещества в прибор.

Методик а (например, подвижная фаза) и числ о введенных проб могут способствовать разложению неподвижной фазы. Рекомендуется, чтобы эта информация прослежива лась для каждой колонки, включая, например, следующ ее : проанализированные образцы и среды для готовых лекарственных препаратов , условия хроматографи рования (подвижная фаза, температура, значение рН . ), услови я хранения и т. д .

8. ПРИМЕР Ы МЕТОДИК ДЛЯ КВАЛИФИКАЦИИ АНАЛИТИЧЕСКИХ КОЛОНОК

Большинств о примеров , приведенных ниже в приложениях 1 и 2, представляют собой методики квалификации, предоставленные производителями.

Параме тры, проверяемые при квалификации колонки для установления ее соответствия, следует вычислять и включать в отчет , как указано в статье №2.2.46 Европейской фармакопеи.

Следует учесть все различия, которые могут наблюдаться между параметрами, определенными в спецификации производителя или расчетами прибора по умолчанию и требованиями статьи Европейской фармакопеи 2.2.46. (Примечание : д овольно часто ПО приборов по умолчанию вычисляет р азмывание задней границы пика способом, описанным в USP ).

9 . СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1) ISO/IEC 17025:2017 General requirements for the competence of testing and calibration laboratories

2) European Pharmacopoeia Chapter 2.2.46 “ Chromatographic separation techniques ” .

3) Column performance test mixture for liquid chromatography — standard reference material 870. NIST.

4) HPLC column classification. USP Pharmacopeia Forum, Vol. 31(2).

А . ПРИМЕРЫ КВАЛИФИКАЦИИ АНАЛИТИЧЕСКИХ КОЛОНОК ДЛЯ ЖХ

Хроматографические условия в следующих примерах испытаний приводятся для колонок размером 250 мм ( длина ) x 4,6 мм (диаметр) . При тестировании колонок другого размера хроматографические условия придется адаптирова ть согласно требованиям Евр. ф арм.2.2.46.

Характеристики хроматографической системы

Испытуемая смесь (подвижная фаза из растворителей)

Колонки для обращенно-фазовой ЖХ с C8 и C18 (также подходит для колонок с C4).

Подвижная фаза: ацетонитрил:вода = 58:42% (по объему )

Скорость потока: 1,0 мл/мин

Детектирование: 254 нм

Объем вводимой пробы: 5 мкл

Урацил – 0,005 мг/мл,

Толуол – 4,0 мг/мл,

N,N-диэтил-мета-толуамид – 0,6 мг/мл.

Фактор асимметрии ( As ) = от 0,8 до 1,5

Rs > 1,5 (между соседними пиками)

Число теоретических тарелок ( N ) > 3 000 (для толуола)

αфенол/толуол и αN,N-диэтил-мета-толуамид/толуол ≥ 1,5

Индикатор времени удерживания ( t M ) — у рацил

Колонки для обращенно-фазовой ЖХ с нитрильной группой

Подвижная фаза: метанол:вода = 70:30 % ( по объему )

Скорость потока: 1,0 мл/мин

Детектирование: 254 нм

Объем вводимой пробы: 5 мкл

Урацил – 10 мкг/мл,

Фенол – 200 мкг/мл,

Толуол – 800 мкг/мл,

4-хлорнитробензол – 25 мкг/мл,

Нафталин – 40 мкг/мл.

As = от 0,8 до 1,5

N > 3 000 (для нафталина)

Rs ≥ 1,5 (между соседними пиками)

Индикатор времени удерживания ( t M ) — урацил

Колонки для обращенно-фазовой ЖХ с фенильной группой

Подвижная фаза: ацетонитрил:вода = 65:35% ( по объему )

Скорость потока: 1,0 мл/мин

Детектирование: 254 нм

Объем вводимой пробы: 1 мкл

Урацил – 0,01 мг/мл,

Ацетофенон – 0,22 мг/мл,

Толуол – 9,42 мг/мл,

Нафталин – 9,42 мг/мл

As = от 0,8 до 1,5

Rs > 1,5 (между соседними пиками)

N > 3 000 (для нафталина)

α ацетофенон/толуол и α толуол/нафталин ≥ 1.5

Индикатор времени удерживания ( t M ) — у рацил

Колонки для нормальн о-фазовой ЖХ с Si , NH2, NO2 , диол ом , нитрильной группой )

Подвижная фаза: гексан:этанол R = 95:5% ( по объему )

Скорость потока: 1,0 мл/мин

Детектирование: 254 нм

Объем вводимой пробы: 5 мкл

Диэтилфталат 1,0 мг/мл

Диметилфталат 1,0 мг/мл

A s = от 0,8 до 1,5

R s > 1,5 (между близлежащими пиками)

α диэтилфталат / диметилфталат ≥ 1,5

Индикатор времени удерживания ( t M ) — толуол

СИЛЬНЫЙ И СЛАБЫЙ КАТИОННЫЙ ОБМЕН (сильные катионобменники ( SCX ); слабые катионобменники (WCX))

Подвижная фаза: 0,15 М диаммоний гидрофосфатный буфер, рН=6,0

Скорость потока : 1,0 мл/мин

Детектирование: 254 нм

Температура: комнатная температура

Объем вводимой пробы: 10 мкл

Цитозин 7 мкг/мл (растворитель: вода)

As = от 0,8 до 1,5

α урацил / цитозин ≥ 1,5

СИЛЬНЫЙ И СЛАБЫЙ АНИОННЫЙ ОБМЕН (сильные анионобменники ( SAX ); слабые анионобменники (WAX))

Подвижная фаза: 0,0 5 М натрия дигидрофосфатный буфер, рН= 3 ,0

Детектирование: 254 нм

Объем вводимой пробы: 10 мкл

Уридинмонофосфат 7 мкг/мл

As = от 0,8 до 1,5

α уридин / уридинмонофосфат ≥ 1,5

КВАЛИФИКАЦИЯ ХИРАЛЬНЫХ КОЛОНОК

Рекомендуется проводить испытания данного типа колонок с использованием тестовой смеси, следуя инструкциям по контрол ю качества, поставляем ым вместе с колонкой.

Результаты следует сравнить с результатами, указанными на контрольной хроматограмме, поставляемой производителем.

КОЛОНКИ ДЛЯ ЭКСКЛЮЗИОННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

В контроле качества терапевтических белков (например, монографии на иммуноглобулин 0338 и 0918 и монография на альбумин 0255 ) очень широко использу ю тся колонк и на основе гидрофильного силикагеля для хроматографии R с диапазоном фракционирования для белков молекулярной массой от 10 000 до 500 000 Да .

Подвижная фаза: растворяют 4,873 г натрия фосфорнокислого двузамещённого двуводного R, 1,741 г натрия фосфорнокислого однозамещенного одноводного R и 11,688 г натрия хлорида R в 1 л воды R.

размер частиц 10 мкм: длина = 600 мм, внутренний диаметр: 7,5 мм

— размер частиц 5 мкм: длина = 300 мм, внутренний диаметр: 7,5 мм

Скорость потока: 0,5 мл/мин

Детектирование: 280 нм

Объем вводимой пробы: 20 мкл

Тиреоглобулин (бычий, молекулярная масса 670 кДа ) 5,0 г/л

Гамма-глобулин (бычий, молекулярная масса 158 кДа ) 5,0 г/л

Овальбумин (куриный, молекулярная масса 44 кДа ) 5,0 г/л

Миоглобин (лошадиный, молекулярная масса 17 кДа ) 2,5 г/л

Ви тамин В12 (молекулярная масса 1, 350 кДа ) 0,5 г/л

Порядок растворения: тиреоглобулин, гамма-глобулин, овальбумин, миоглобин и витамин В12. Могут присутствовать дополнительные пики между тиреоглобулином и γ-глобулином (пик димера γ-глобулина ) и перед тиреоглобулином (пик агрегатов).

N (Витамин В12): не менее 20 000

As (Витамин В12 ): от 0,8 до 1,5

Разрешение (Миоглобин/овальбумин): не менее 2,5

ПРИМЕРЫ КВАЛИФИКАЦИИ АНАЛИТИЧЕСКИХ КОЛОНОК ДЛЯ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Характеристики хроматографической системы (ПИД)

Испытуемая смесь ( растворитель: метилен хлорид )

Колонки малого диаметра (внутренний диаметр 0,25 мм или 0,32 мм):

Линейная скорость потока: 20-25 см/сек

Температура устройства для ввода пробы (инжектора): 220°C

Температура термостата: 100-135°C

Температура ПИД : 220°C

Коэффициент разделения потока: 100:1 (в колонку вводится 5 нг каждого компонента)

Объем вводимой пробы: 1 мкл

Колонки большого диаметра (внутренний диаметр 0,53 мм или 0,75 мм):

Разбавляют смесь хлористым метиленом в соотношении 1:10 и вводят 0,2 мкл в колонку в режиме прямого ввода пробы.

2-октанон 0,5 мг/мл

1-октанол 0,5 мг/мл

2,6-диметилфенол 0,5 мг/мл

ундекан 0,5 мг/мл

2,6-диметиланилин 0,5 мг/мл

додекан 0,5 мг/мл

тридекан 0,5 мг/мл

As = от 0,8 до 1,5

Число теоретических тарелок на метр ( для пика с k равным от 5 до 7 ): требования указаны в т аблице 1 (см. ниже )

α между близлежащими пиками ≥ 1,5

Процентное выражение отклика для активного компонента ≥ 70% (см. ниже)

Индикатор времени удерживания ( t M ) — метан

КОЛОНКИ СРЕДНЕЙ ПОЛЯРНОСТИ

Колонки малого диаметра (внутренний диаметр 0,25 мм или 0,32 мм):

Линейная скорость потока: 20-25 см/сек

Температура устройства для ввода пробы (инжектора): 220°C

Температура термостата: 100-135°C

Температура ПИД : 220°C

Коэффициент разделения потока: 100:1 (в колонку вводится 5 нг каждого компонента)

Объем вводимой пробы: 1 мкл

Колонки большого диаметра (внутренний диаметр 0,53 мм или 0,75 мм):

Разбавляют смесь хлористым метиленом в соотношении 1:10 и вводят 0,2 мкл в колонку в режиме прямого ввода пробы.

н-додекан 0,5 мг/мл

н-тетрадекан 0,5 мг/мл

н-тридекан 0,5 мг/мл

н-ундекан 0,5 мг/мл

1-октанол 0,5 мг/мл

2-октанон 0,5 мг/мл

2,6-диметиланилин 0,5 мг/мл

2,6-диметилфенол 0,5 мг/мл

As = от 0,8 до 1,5

Число теоретических тарелок на метр ( для пика с k равным от 5 до 7 ) : требования указаны в т аблице 1 (см. ниже )

α между близлежащими пиками ≥ 1,5

Процентное выражение отклика для активного компонента ≥ 70%.

Индикатор времени удерживания ( t M ) — метан

Колонки малого диаметра (внутренний диаметр 0,25 мм или 0,32 мм):

Линейная скорость потока: 20-25 см/сек

Температура устройства для ввода пробы (инжектора): 220°C

Температура термостата: 145-185°C

Температура ПИД: 220°C

Коэффициент разделения потока: 100:1 (в колонку вводится 5 нг каждого компонента)

Объем вводимой пробы: 1 мкл

Колонки большого диаметра (внутренний диаметр 0,53 мм или 0,75 мм):

Разбавляют смесь хлористым метиленом в соотношении 1:10 и вводят 0,2 мкл в колонку в режиме прямого ввода пробы.

н-эйкозан 0,5 мг/мл

н-гептадекан 0,5 мг/мл

н-гексадекан 0,5 мг/мл

н-октадекан 0,5 мг/мл

н-пентадекан 0,5 мг/мл

1-октанол 0,5 мг/мл

2-октанон 0,5 мг/мл

2,6-диметиланилин 0,5 мг/мл

2,6-диметилфенол 0,5 мг/мл

As = от 0,8 до 1,5

Число теоретических тарелок на метр ( для пика с k равным от 5 до 7 ) : требования указаны в т аблице 1 (см. ниже)

α между близлежащими пиками ≥ 1,5

Процентное выражение отклика для активного компонента ≥ 70%

Индикатор времени удерживания ( t M ) — метан

As — ф актор асимметрии ,

N — число теоретических тарелок ,

α — коэффициент селективности ( α ) , то есть отношение коэффициентов удерживания (k) двух соседних пиков .

Расчет % отклика на действующее вещество (колонки для ГХ)

Вычисляют процент высоты пиков н-алканов путем построения линии, соединяющей максимумы пиков этих неадсорбирующих веществ.

% отклика = (высота пика действующего вещества/высота от нулевой линии до кривой, соединяющей верхние точки пиков углеводорода) х100

% отклика служит внутренним стандартом для точного отслеживания того, что с помощью колонки хорошо удается выделить каждое из действующих веществ. Эта техника учитывает все типы деформации пиков.

Производительность колонки для определенного компонента можно вычислить как количество тарелок (также называемых теоретическими).

Этот параметр очень полезен для сравнения колонок для ГХ. В таблице 1 ниже представлены требования к рабочим характеристикам средней колонки, выраженные в тарелках на метр, в соответствии со внутренним диаметром колонки и полярностью фазы.

Таблица 1. Сравнение средней эффективности по полярности фазы и внутреннему диаметру колонки

Источник