Колонки для вэжх ods

Avet пишет:
Уважаемые коллеги, хочу открыть тему для обсуждения: «хорошие» и «плохие» колонки для ВЭЖХ.

Колонки для ВЭЖХ — коммерческие узкоспециализированные продукты.
Среди них нет идеальных, подходящих для решения любых задач разделения.
На этом обсуждение «хороших» и «плохих» колонок можно закончить.
Хорошим или плохим может быть лишь решение конкретной аналитической задачи.

Avet пишет:
Колонки, ругаемые г-ном Сычевым, занимают львиную долю фармацевтических методик, валидированы и работают годами. Почему к ним такой негатив? Может и г-н Сычев откликнется?

Колонки, которые ругает Константин, действительно занимают львиную долю среди прочих: например, в фарм.анализе WatersSymmetry — это негласный стандарт. Но равно как и прочие, WatersSymmetry просто немного лучше чем WatersSpherisorb (предыдущий негласный стандарт). Однако и то, и другое — откровенно не самые лучшие варианты. Во-первых, по удельной эффективности. Во-вторых, по сроку службы. Они проседают за милу душу. В-третьих, по цене. В-четвертых, по содержанию металлов (да, Symmetry лучше, но всё равно, далеко не идеал). В-пятых, по разнообразию:

Luna, например, от серии к серии вообще от серии к серии воспроизводится с трудом.

daemond91 пишет:
Luna, например, от серии к серии вообще от серии к серии воспроизводится с трудом.

Это феноменекс, а не вотерс. Крайне стабильный сорбент. Лучше только Zorbax Eclipse Plus. Так что имеете шанс пояснить.

daemond91 пишет:
Они проседают за милу душу

Делаете одну колонку донорской, скидываете фрит и перекладываете сорбент в просевшие. Для колонок-вёсел 250мм-4,6мм-5мкм не сильно сложно.
Для фазы из 80-х методы работы тоже из 80-х.

Avet пишет:
Уважаемые коллеги, хочу открыть тему для обсуждения: «хорошие» и «плохие» колонки для ВЭЖХ.

Колонки для ВЭЖХ — коммерческие узкоспециализированные продукты.
Среди них нет идеальных, подходящих для решения любых задач разделения.
На этом обсуждение «хороших» и «плохих» колонок можно закончить.
Хорошим или плохим может быть лишь решение конкретной аналитической задачи.

Источник

Колонки для ВЭЖХ YMC J’Sphere ODS

ВЭЖХ колонки J’Sphere ODS – это:

• обращенно фазовые ВЭЖХ колонки высокого качества;
• диоксид кремния с сильно развитой поверхностью 8 нм и 4 мкм;
• большое содержание силоксана;
• дополнительная селективность посредством H-связи;

Селективность данной серии колонок позволяет наилучшим образом использовать их для контроля качества фармацевтических препаратов содержащих гормонов, стероидов.

Общие характеристики

Компания YMC применила новый подход для создания дивергентных полярностей и усовершенствования последовательности действий в синтезе реверсных состояний фазы. С фазой J’sphere ODS длина алкильной цепочки сохраняется постоянной (C18), но содержание групп C18 на поверхности диоксида кремния различно и необходимо для создания трех различных модификаций фазы J’sphere ODS с дифференциальной гидрофобностью.

Характеристики колонок YMC J’Sphere ODS

Пример: влияние показателя загрузки по углероду на разделение щелочных соединений

1. Uracil
2. Pocainamide
3. N-Acetylprocainamide
4. 4-Hydroxyacetophenone

Колонки J’sphere ODS-H80

Фаза J’sphere ODS-H80 – наиболее гидрофобно-стационарная в этой серии. Это фаза с плотно покрытыми полимерными химически связанными, неустойчивыми группами C18 с большой загрузкой по углероду, что обеспечивает прочное, доминирующее, липофильное взаимодействие с неполярными участками типовых молекул. При этом способность образовывать H-связь обеспечивает дополнительную селективность, которая имеет существенное значение для сложных разделений, например, фармацевтических и соответствующих метаболических различий. Стереоизомеры также можно разделить колонками с фазой YMC J’sphere ODS-H80. Один из удачных примеров деления: деление пептидов и щелочных соединений.

Колонки J’sphere ODS-M80

Менее плотно покрытые мономерные химически связанные группы С18 фазы J’sphere ODS-M80 обеспечивают умеренную гидрофобность. Так как липофильные свойства в данном случае ниже, то способность к образованию H-соединения становится еще более необходимой. Фаза J’sphere ODS-M80 имеет ярко выраженную, сбалансированную и крайне гибкую полярность. Используя весьма обширный диапазон полярности элюента, в зависимости от типа разделения, можно широко использовать колонки J’sphere ODS-M80 для разных задач. Колонки J’sphere ODS-M80 – это гибкий инструмент, удобный для применения в различных областях аналитической жидкостной хроматографии высокого давления, включая анализ фармацевтических средств и контроль качества ветеринарных препаратов.

Колонки J’sphere ODS-L80

Фаза J’sphere ODS-L80 имеет небольшую степень полимерного покрытия химически связанных групп С18, обеспечивающую лишь незначительное сохранение гидрофобных свойств. Крайне высокая способность к образованию H-связи делает колонки фазы J’sphere ODS-L80 очень полезными при разделении полярных соединений. Часто в таких структурах встречаются молекулярные участки, чувствительные к H-связи и, как следствие, они легко могут быть разделены при помощи колонок с данной селективностью.

Источник

Колонки, предколонки и сорбенты для жидкостной хроматографии

Колонка является основным элементом жидкостного хроматографа, обеспечивающим разделение смесей веществ и очистку целевого продукта. Материалом для ее изготовления может служить нержавеющая сталь, пластиковый полимер или стекло. В конструкционном плане она представляет собой трубку или полый цилиндр, заполненный изнутри сорбентом (твердой фазой). Внутренний диаметр разных типов колонок может варьировать от 1 мм до 1 м и более.

По своему предназначению хроматографические колонки подразделяются на аналитические, микропрепаративные, препаративные и промышленные. Помимо этого, в жидкостной хроматографии получили распространение защитные колонки (для предохранения основной колонки от загрязнения) и предколонки, используемые для предварительной очистки анализируемых проб перед их инжекцией.

В качестве твердой фазы в колонках используют широкое разнообразие сорбентов, в т. ч.: дисперсные и монолитные силикагели, поперечно-сшитые на основе агарозы и декстрана, полимерные синтетические (см. табл. 1), изготовленные из оксидов алюминия и циркона. По своей структуре они бывают непористыми, поверхностно-пористыми и полно-пористыми. Их также классифицируют по форме (сферическая и нерегулярная) и размеру частиц.

Тип используемого сорбента определяет область его применения в разных видах жидкостной хроматографии: нормально-фазовая (НФХ), обращенно-фазовая (ОФХ), гидрофобная (HIC), гидрофильная (HILIC), аффинная, ионообменная (анионообменная, катионообменная), ион-парная и пр.

Наиболее распространенные силикагельные сорбенты условно подразделяют на немодифицированные и химически привитые. Плотность пришивки разных функциональных групп к поверхности сорбентных частиц может варьировать от 4 до 32% в пересчете на содержащийся в них углерод. По сравнению с немодифицированным силикагелем привитая фаза этого сорбента отличаются лучшей гидролитической стойкостью, более высокой емкостью и селективностью удерживания / элюирования.

Классификация силикагельных сорбентов осуществляется по единой номенклатуре с использованием целого ряда условных обозначений (см. табл. 2). Например, приставка sil (от лат. silica) в фирменных названиях ряда сорбентов (Supelcosil, Kromasil, Hypersil и пр.) без указания связанной фазы обычно означает, что они содержат немодифицированный силикагель.

Популярные производители колонок, предколонок и сорбентов: Agilent, Cytiva, Phenomenex, Supelco (Merck), Thermo FS, Tosoh Corporation, Waters.

Источник

Выбор колонки для ВЭЖХ

Материалы трубок ВЭЖХ-колонок включают SS316 (нержавеющая сталь), ПТФЭ (политетрафторэтилен), ПММК (полиметилметакрилат) и другие материалы. Выбор определяется характеристиками подвижной фазы, давлением на колонке и типом образца. SS316 используется, когда подвижная фаза представляет собой органические растворители и давление на колонке находится в диапазоне от 5 до 30 МПа. Когда подвижная фаза состоит из 100% воды или буферного раствора и давление на колонке менее 4 мПа, выбирается ПММА или ПТФЭ для меньшего влияния на биологические образцы.

Внутренний диаметр

A. Колонки с внутренним диаметром 1-2 мм используются для микроЖХ (МЖХ), например, для ЖХ-масс-спектрометрии. Для обычного анализа такие колонки не рекомендуются, т.к. хотя расход растворителя при их использовании и невелик, требования к оборудованию предъявляются слишком жесткие: необходимо, чтобы хроматограф имел очень маленький экстраколоночный объем. Кроме того, этот вид колонок недолговечен.

B. Колонки с внутренним диаметром 4-6 мм (3.9, 4.0, 4.6, 5.0, 6.0 мм) подходят для обычного анализа небольших количеств проб. Колонки с внутренним диаметром 4.6 мм наиболее распространены. Оптимальная скорость потока для них составляет 1 мл/мин. Эти колонки имеют высокую эффективность, стабильные эксплуатационные показатели и более длительный срок службы.

C. Колонки с внутренним диаметром 7.8-10.0 мм являются полупрепаративными. Хроматографические условия для них могут быть перенесены с аналитической колонки. Такими колонками можно оснастить обычный жидкостный хроматограф для сбора небольшого количества высокочистых веществ для исследований.

D. Колонки с внутренним диаметром 20-100 мм представляют собой препаративные колонки, которые могут работать с большими количествами чистых компонентов, имеющих коммерческую ценность. В настоящее время, хотя их цена выше, такими колонками должны быть оборудованы хроматографы для фармацевтической промышленности.

Длина трубки

Длина колонок для ВЭЖХ составляет от 50 до 500 мм. Для обычного анализа чаще всего используют колонки длиной 150-250 мм. Колонки длиннее 250 мм имеют более высокую эффективность, но они также имеют и более высокое давление. Увеличение длины колонки для повышения эффективности не экономично.

Источник