Колонка с катионообменной смолой

Колонки для катионообменной хроматографии

Колонки HC-40 и HC-75

Полимерные колонки, сетчатой структуры, мягко-гелевые для катионного, лигандного обмена, разделения углеводородов:

• Разделение моно- и дисахаридов
• Выделение олигомеров от DP1 до DP8
• Совместим с RI детекторами

• Размер частиц: 9 мкм
• Внутренний диаметр колонок: 7,8 мм
• Колонки изготовлены из нержавеющей стали 316

• Размер частиц: 9 мкм
• Три внутренних диаметра колонок: 4,1, 7,8 и 10 мм
• Колонки изготовлены из нержавеющей стали 316
• Три формы: кальций, свинец и водород

Колонки HC-40 для катионного обмена

Размер частиц
Внут. диаметр х длина	10-15 мкм
7.8 X 305 мм	79432

Колонки HC-75 для катионнообменной хроматографии

Предколонки для колонок HC-40 и HC-75

Размер частиц и вещество-носитель

Внут. диаметр х длина

Для стальных колонок
Стартовый набор для катионнообменной хроматографии (носитель — водород) (1 холдер, 1 картридж)	79133
Картриджи для катионнообменной хроматографии (носитель водород) (2 шт./уп.)	79134
Стартовый набор для анионобменной хроматографии (носитель — углекислота) (1 холдер, 1 картридж)	79866
Картриджи для анионного обмена (2 шт./уп.)	79865

Колонки PRP-X200

Полимерные колонки для катионообменной хроматографии для разделения органических и неорганических катионов.

• Простое разделение одно- и двухвалентных катионов
• Устойчивы к pH от 1 до 13
• Используются с органическими растворителями до 100% для элюции гидрофобных катионов и чистки колонок

• Размер частиц: 10 мкм
• Внутренний диаметр колонок: от 2,1 до 10 мкм
• Материал, из которого изготовлены колонки: нержавеющая сталь 316 и ПЭЭК
• Аналитические и препаративные / полупрепаративные предколонки

Размер частиц
Внут. диаметр x Длина	10 мкм
2.1 x 150 мм	79394
4.1 x 100 мм	79363
4.1 x 150 мм	79441
4.1 x 250 мм	79442
4.6 x 150 мм*	79384
4.6 x 250 мм*	* PEEK Hardware

Предколонки для PRP-X200

Для стальных колонок	Для колонок из ПЭЭК
Аналитический стартовый набор (1 холдер, 2 картриджа)	79456	79368
Аналитические картриджи (5 шт./уп.)	79449	79369
Препаративный/ полупрепаративный стартовый набор (1 холдер, 1 картридж)	79127
Препаративные/ полупрепаративные картриджи (2 шт./уп.)	79128	—

Колонки PRP-X400

Полимерные колонки для катионообменной хроматографии для выделения глифосата и его метаболитов из питьевой воды.

• Быстрый анализ
• Предел обнаружения менее 10 ppb при использовании техники OPA (превращение в химические производные после выхода элюирования из хроматографической колонки)
• Пригодны для других разделений, таких как инозитол и сахарные спирты

• Размер частиц: 7 мкм
• Внутренний диаметр колонок: от 2,1 до 4,6 мкм
• Материал, из которого изготовлены колонки: нержавеющая сталь 316 и ПЭЭК
• Аналитические и препаративные / полупрепаративные предколонки

Размер частиц
Внут. диаметр x длина	7 мкм
2.1 x 250 мм	79398
4.1 x 150 мм	79717
4.1 x 250 мм	79473
4.6 x 250 мм*	79387
* PEEK Hardware

Предколонки для PRP-X400

Для стальных колонок	Для колонок из ПЭЭК
Аналитический стартовый набор (1 холдер, 2 картриджа)	—	79376
Аналитические картриджи (5 шт./ уп.)	—	79377
Препаративный/ полупрепаративный стартовый набор (1 холдер, 1 картридж)	79131	—
Препаративные/ полупрепаративные картриджи (2 шт./ уп.)	79132	—

Колонки PRP-X800

Полимерные колонки для катионообменной хроматографии для изократического разделения одно- и двухвалентных катионов.

• Изократическое разделение лития, натрия, аммония, калия, магния и кальция
• Градиентное разделение переходных металлов
• Превосходная устойчивость (устойчивы к любым концентрациям воды и органических растаорителей)

Источник

Н-катионитовые (ионно-обменные) колонки

Принцип использования Н-катионитовых (ионно-обменных) колонок

Как правило, Н-катионитовые колонки применяются в качестве вспомогательного оборудования при определении величины удельной электропроводности пропускаемой через устройство пробы воды, что позволяет впоследствии осуществлять надлежащий контроль за ее качеством, а также определять в питательной воде величину общего солесодержания. Считается, что этот способ не вполне совершенен, среди его недостатков называют некоторую идеализацию расчетных систем уравнений при контроле за отдельными характеристиками качества воды, помимо того учитывается не в должной мере минерализация теплоносителя, связанная с концентрацией хлоридов и ионов натрия. Да сами расчеты производятся при 25 градусах по шкале Цельсия, тогда как температура пробы колеблется в пределах 15-50ºС, а это дает известную значимую погрешность в результаты исследований концентрации различных ионов и примесей. Поэтому в настоящее время разрабатываются новые устройства, позволяющие минимизировать эти недочеты в исследованиях. Но и существующие приборы, в частности, применяемые Н-катионитовые (ионно-обменные) колонки вполне способны работать на должном уровне.

Функции Н-катионитовых (ионно-обменных) колонок

По своим функциям современные Н-катионитовые (ионно-обменные) колонки предназначаются под загрузку ионно-обменных смол и/или некоторых других фильтрующих материалов. Они могут быть применены для предварительной подготовки отбираемых проб анализируемых сред (воды), в том числе для Н-катионирования, получения, так называемой «сверхчистой» воды, а также для осуществления механического фильтрования. Причем в процессе работы прозрачный корпус колонок позволяет производить в режиме реального времени визуальную оценку состояния наполнителя. Поскольку на выходе в Н-катионитовые (ионно-обменные) колонки устанавливается, как правило, керамический фильтр, это позволяет избегать засорения и не допускать вымываний смолы, а также обеспечить на выходе линейной скорости истечения жидкости величину не менее чем 25 метров в час.

Дополнительная комплектация Н-катионитовых (ионно-обменных) колонок

В качестве вспомогательного оборудования, к которому в настоящее время относятся и Н-катионитовые (ионно-обменные) колонки, компании-поставщики предлагают также модули «сверхчистой» воды и другие устройства. В поставку могут включаться также стандартизированные комплекты специализированного программного обеспечения, позволяющего, кроме всего прочего, без особых проблем интегрировать существующее стандартное оборудование, в том числе и Н-катионитовые (ионно-обменные) колонки в состав создаваемых автоматизированных систем сбора данных и управления, которые чаще всего способны базироваться на OPC спецификациях.

Источник

Ионообменные колонки Tosoh Bioscience

Принципы хроматографии

Анализ, выделение и очистка биомолекул могут быть выполнены с помощью ряда хроматографических режимов. Каждый режим основан на конкретных физических, химических или биологических взаимодействиях между биомолекулой образца и сорбентом.

Tosoh Bioscience предлагает полную линейку сорбентов TSKgel и TOYOPEARL, а также упакованные колонки TSKgel для всех известных режимов жидкостной хроматографии.

Различные режимы хроматографии включают разделение, основанное на специфических особенностях целевой молекулы или образца, таких как размер, заряд, гидрофобность, специфические особенности молекулы.

Содержание

О Tosoh Bioscience

С ТОЧКИ ЗРЕНИЯ ГЛОБАЛЬНОЙ ПЕРСПЕКТИВЫ.

Tosoh Bioscience является ведущим производителем в области жидкостной хроматографии. Линейка продукции из более чем 500 специальных продуктов включает в себя приборы для эксклюзионной/ гель-проникающей хроматографии, а также полную линейку сорбентов и упакованных колонок для ВЭЖХ (ультра-ВЭЖХ) для всех распространенных режимов жидкостной хроматографии. За последние 40 лет колонки TSKgel SW стали мировым отраслевым стандартом для эксклюзионной хроматографии биомолекул.

Производственные площадки Tosoh в Японии предоставляют продукцию отделам продаж и поддержки в США и Европе, обеспечивая полное глобальное покрытие. Технические специалисты в Европейской штаб-квартире оказывают помощь в разработке методов ВЭЖХ или методов очистки, в масштабировании методов, упаковке колонн. Tosoh предлагает хроматографические семинары, обучение на местах. Также компания является единственным спонсором серии конференций по биоразделениям методами гидрофобной хроматография / ОФХ.

ИСТОРИЯ TOSOH

1935	ОСНОВАНИЕ TOYO SODA MANUFACTURING CO., LTD.
1936	ОТКРЫТИЕ КОМПЛЕКСА NANYO MANUFACTURING
1971	СОЗДАН ОТДЕЛ НАУЧНЫХ ИНСТРУМЕНТОВ, ПЕРВАЯ ГПХ КОЛОНКА TSKgel РАЗРАБОТАНА TOSOH
1974	ПОСТРОЕН ЗАВОД ПО ПРОИЗВОДСТВУ ВЭЖХ-КОЛОНОК
1979	TOSOH РАЗРАБАТЫВАЕТ МАТЕРИАЛ TOYOPEARL
1983	TOSOH РАЗРАБАТЫВАЕТ МАТЕРИАЛ ДЛЯ ХРОМАТГРРАФИИ ГИДРОФОБНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ
1987	ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВО TOSOHAAS США СОЗДАНО В Монтгомеривилле
1989	ПРЕДСТАВИТЕЛЬСТВО TOSOHAAS GMBH СОЗДАНО В ШТУТГАРТЕ
1995	ЗАВОД TOSOH NANYO GEL ПОЛУЧИЛ ISO 9001
2002 / 2003	ВСЕ ПОДРАЗДЕЛЕНИЯ ПО НАУЧНОЙ И ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ TOSOH В ЕВРОПЕ, УНИФИЦИРОВАНЫ ПОД НАЗВАНИЕМ TOSOH BIOSCIENCE.
2008	EcoSEC, СИСТЕМА ГПХ 7-ГО ПОКОЛЕНИЯ, ПРЕДСТАВЛЕНА НА МИРОВОМ РЫНКЕ
2010	TOSOH ОТМЕЧАЕТ 75 ЛЕТ В БИЗНЕСЕ ОТКРЫТИЕМ ПЯТИ НОВЫХ ЗАВОДОВ И ПРОДОЛЖЕНИЕМ РАСШИРЕНИЯ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В КИТАЕ
2011	TOSOH BIOSCIENCE ОТМЕЧАЕТ 40 ЛЕТ РАБОТЫ
2012	TOSOH ВЫПУСКАЕТ ПЕРВЫЙ TOYOPEARL MIXED-MODE СОРБЕНТ TOYOPEARL MX-Trp-650M
2013	TOSOH ВЫПУСКАЕТ СОРБЕНТ ДЛЯ ХРОМАТОГРАФИИ PROTEIN A ВЫСОКОЙ ЁМКОСТИ
2014	TOSOH BIOSCIENCE GMBH ОТМЕЧАЕТ 25-ЛЕТИЕ В ШТУТГАРТЕ
2015	TOSOH BIOSCIENCE УСПЕШНО ПЕРЕМЕЩАЕТ СВОИ ОФИСЫ ПРОДАЖ И МАРКЕТИНГА В ГРИШЕЙМ, ДАРМСТАДТ

ИОХ — ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Ионообменная хроматография (ИОХ) является один из наиболее часто используемых хроматографических режимов в разделении и очистке биомолекул. Это неденатурирующий метод, который используется для анализа и на всех этапах и масштабах очистки: от очистки в микромасштабе до последующих разделений в промышленном масштабе.

Tosoh Bioscience предлагает аналитические и полупрепаративные ионообменные колонки для ВЭЖХ, а также ионообменные смолы для крупномасштабной биоочистки.

Колонки ВЭЖХ TSKgel заполнены пористыми или непористыми сферическими частицами на основе диоксида кремния или полимера. Это идеальный выбор для широкого спектра применений в области НИОКР, контроля качества или мониторинга реакций.

ИОХ — КАК ЭТО РАБОТАЕТ

В ИОХ удерживаются молекулы на основе ионных взаимодействий. Заряженные функциональные группы неподвижной фазы взаимодействуют с ионами аналита противоположного заряда. ИОХ подразделяется на катионообменную и анионообменную хроматографию.

Анионообменные смолы несут положительно заряженные группы, которые притягивают отрицательно заряженные анионы. Катионообменные смолы имеют отрицательно заряженные группы, которые привлекают положительно заряженные катионы. Заряженные целевые молекулы удерживаются на неподвижной фазе, но могут быть элюированы с увеличением концентрации аналогично заряженного иона, который вытеснит аналит или целевые ионы из неподвижной фазы.

Функциональные группы белков имеют и положительные и отрицательные заряды. ИОХ разделяет белки в соответствии с их суммарным поверхностным зарядом, который зависит от pH и ионной силы подвижной фазы. В соответствии с различиями в их общем заряде и распределении поверхностного заряда, белки могут быть разделены с помощью ИОХ.

ИОХ использует то что взаимосвязь между чистым поверхностным зарядом и pH является уникальной для конкретного белка. При pH, эквивалентном его изоэлектрической точке (pI), белок не имеет суммарного заряда и не будет взаимодействовать с заряженной стационарной фазой. При pH выше pI белок будет иметь отрицательный суммарный заряд и поэтому будет связываться с положительно заряженным анионообменником. При pH ниже его pI он будет иметь положительный суммарный заряд и, следовательно, будет взаимодействовать с отрицательно заряженным катионитом. Регулируя pH или концентрацию соли в подвижной фазе, можно оптимизировать разделение. Для загрузки, pH и ионная сила выбираются таким образом, чтобы целевые молекулы или аналиты связывались с неподвижной фазой (рисунок ниже).

Кислотный pH: все 3 компонента заряжены положительно. Они связываются с катионитами и элюируются, применяя солевой градиент .	Слабо кислотное pH: красный и зеленый заряжены положительно и связываются с катионообменниками. синий отрицательно заряжен и проходит.	Слабо щелочной pH: синий и зеленый заряжены отрицательно и проходят через катионит. Красный по-прежнему заряжен положительно и связывается.	Сильно щелочной pH: все три компонента заряжены отрицательно и проходят через катионит.
Кислотный pH: все три компонента заряжены положительно и проходят через аниониты.	Слабо кислотный pH: красный и зеленый заряжены положительно и проходят. Синий заряжен отрицательно и связывается с анионитами.	Слабо щелочной pH: красный по-прежнему положительно заряжен и проходит синий и зеленый отрицательно заряжены и связываются с анионообменниками	Щелочной pH: все три компонента заряжены отрицательно. Они связываются с анионитами и элюируются применением солевого градиента.

ИОХ — ПРЕДИСЛОВИЕ К КОЛОНКАМ TSKgel ДЛЯ ИОХ

Элюирование обычно проводят путем изменения ионной силы подвижной фазы с применением солевого градиента. При увеличении концентрации соли в подвижной фазе, ионы соли конкурируют со связанными молекулами за функциональные группы стационарной фазы. Чем выше суммарный заряд молекулы, тем выше концентрация соли, необходимая для элюции. Очень сильно связанные соединения удаляются в конце элюирования на стадии промывки солевым буфером с высокой концентрацией соли.

Ионообменные смолы классифицируются как слабые или сильные ионообменники. Термины «сильный» и «слабый» не относятся к характеристикам смол или силе взаимодействия смолы и целевой молекулы.

«Сильный», соответственно «слабый» относится к степени, в которой ионообменная способность изменяется с изменением рН. Сильные ионообменные группы имеют крутую кривую титрования. Они не показывают изменения своего состояния ионизации в зависимости от pH и остаются полностью заряженными в широком диапазоне pH.

Типичные сильные анионообменные группы представляют собой четвертичные аминные группы (тип Q & QAE), типичные сильные катионообменные группы представляют собой сульфо- или сульфопропильные группы (тип S & SP). Карбоксиметил (CM, катионный) и диэтиламиноэтил (DEAE, анионный) являются слабыми ионообменными группами. На рисунке показаны значения pK_a для этих лигандов.

Катионообменные группы	Структура
Карбоксиметил (CM)	Слабый	-O-CH2COO
Сульфопропил (SP)	Сильный	-O-R-O-CH2-CH2-CH2-SO3—
Анионообменные группы
Диэтиламиноэтил (DEAE)	Слабый	-O-CH2-CH2-N+-(C2H5)2
Четвертичный аммоний (Q)	Сильный	-O-R-N+-(CH3)3
Четвертичный аминоэтил (QAE)	Сильный	-O-CH2-CH2-N+H-(CH3)3

Tosoh Bioscience предлагает широкий спектр высокоэффективных колонок для анализа и выделения биомолекул с помощью анионообменной и катионообменной хроматографии. Для любого режима ИОХ в продуктовой линейке Tosoh есть колонки на основе метакрилата и диоксида кремния. Большинство доступных привитых фаз предлагается в аналитическом, а также полупрепаративном форматах. Размеры частиц варьируются от 2,5 мкм для быстрого анализа до 20 мкм для полупрепаративных разделений. Белки, пептиды, олигонуклеотиды и нуклеиновые кислоты типичные аналиты, которые анализируют или выделяют на колонках TSKgel для ИОХ.

СОРБЕНТЫ И ПРИВИТЫЕ ФАЗЫ

Метакрилат, диоксид кремния и полистирол используются в качестве матриц для линии ионообменных колонок TSKgel. Базовые смолы дериватизируют либо с помощью диэтиламиноэтильных (DEAE), четвертичных аммониевых (Q), сульфопропильных (SP) или карбоксиметил (CM) функциональных групп с получением слабых анионитов, сильных анионитов. сильных и слабых катионитов, соответственно.

Колонки из серии TSKgel SW на основе диоксида кремния обычно используются для разделения низкомолекулярных соединений, таких как фармацевтические препараты, нуклеотиды или мелкие пептиды.

Химия метакрилатного остова дает прочную гидрофильную частицу, которая подходит в качестве основы для высокоэффективного аналитического и препаративного разделения биомолекул. Базовая смола G5000 PW серии TSKgel 5PW представляет собой сферическую частицу со средним размером пор 100 нанометров (1.000 Ангстрем).

Колонки TSKgel BioAssist также основаны на частицах метакрилата с более крупными порами (400 нанометров для BioAssist Q и 130 нанометров для BioAssist S), обеспечивающих лучший доступ к функциональным группам для крупных белков.

Производные метакрилата также основа колонн с непористой смолой, таких как серии TSKgel NPR и STAT. Поскольку ограничивающая скорость диффузия пор устраняется непористыми частицами, время анализа может сокращаться на 80% без потери разрешения. Кроме того, выходы обычно превышают 90%.

Колонки TSKgel STAT являются новейшим дополнением к линейке колонок Tosoh для ИОХ. Инновационная химия привитых фаз дает колонки с высокой емкостью по образцу, в то время как традиционные непористые смолы обычно показывают ограниченную емкость из-за меньшей площади поверхности. Конкретные специфические разделения решаются с помощью использования колонок и частиц различных размеров.

Для специальных применений также предлагаются колонны на основе полистирола. Они наиболее подходят для анализа сахаров с низкой молекулярной массой, аминокислот, отдельных нуклеиновых кислот и малых лекарств-кандидатов. Для получения подробной информации об этих специальных колонках, пожалуйста, обратитесь к каталогу Tosoh.

Колонки BioAssist

• Высокая емкость даже для больших белков (1 миллион Да)

• Меньше прогонов для необходимого количества образцов

• Уникальная структура пор обеспечивает быстрый перенос массы

• Более резкие пики улучшают анализ и выделение

• Биосовместимые колонки из PEEK

• Меньшая потеря образца из-за адсорбции

• Доступны в аналитическом и полупрепаративном форматах

• Легко масштабировать

Ионообменные колонки на полимерной основеt

• Метакрилатная основа

• Механически и химически стабильные (рН 2,0-12,0)
• Выдерживают многократную очистку щелочью, органические растворители, денатуранты и ПАВ

• Большой размер пор (100 нм) (кроме белков до

  5 000 000 Да)

• Используйте одну колонку для большинства биополимеров

• Колонки на основе непористой смолы (STAT и NPR)

• Быстрый анализ качества и контроль процесса

• Некоторые колонки доступны с мм

• Снижение расхода растворителя и времени анализа

Ионообменные колонки на основе силикагеля

• Меньший размер пор (2SW = 12,5 нм и 3SW = 25 нм)

• Наиболее подходит для анализа образцов с небольшой ММ, таких как нуклеотиды, лекарственные препараты, катехоламины и небольшие пептиды или белки.

ИОХ — СВОЙСТВА КОЛОНОК TSKgel ДЛЯ ИОХ

TSKgel АНИОН ОБМЕННЫЕ КОЛОНКИ

400

0

0

0

0

TSKgel КАТИОН ОБМЕННЫЕ КОЛОНКИ

4,000,000

0

0

0

* pMA = полиметакрилат; PS-DVB = полистирол-дивинилбензол; ** Полиэтиленгликоль;

*** PEEK = полиэтилэфиркетон; S = нерж сталь; G = стекло; (1) γ-глобулин; (2) гемоглобин; (3) лизоцим.

ИОХ — ВЫБОР КОЛОНОК TSKgel ДЛЯ ИОХ

TSKgel	Matrix *	Particle size (µm)	Pore size (µm)	Functional group	Counter ion	Excl. limit, PEG ** (Da)	Capacity (mg BSA/mL)	Small ion capacity meq/mL	pKa	Column hard-ware ***
BioAssist Q	pMA	10; 13	Polyamine	Cl —	>5,000,000	70	0.1	9.4	PEEK
SuperQ-5PW	pMA	10; 13	100	Trimethyl-amino	Cl —	1,000,000	100	>0.13	12.2	S,G
DEAE-5PW	pMA	10; 13; 20	100	DEAE	Cl —	1,000,000	30	0.1	11.5	S,G
Q-STAT	pMA	7; 10	Trimethyl-amino	Cl —	500	20	0.27	10.5	S
DNA-STAT	pMA	5	Trimethyl-amino	Cl —	500	35	0.27;	10.5	S
DEAE-NPR	pMA	2.5	DEAE	Cl —	500	5	>0.1	11.2	S
DNA-NPR	pMA	2.5	Proprietary	ClO — 4	500	5	>0.1	11.2	S
DEAE-2SW	Silica	5	12.5	DEAE	H PO — 2 4	10,000	ND	>0.3	11.2	S
DEAE-3SW	Silica	10	25	DEAE	Cl —	30,000	ND	>0.3	11.2	S
Sugar AXI	PS-DVB	8	6	Trimethyl-amino	HBO — 3	ND	>0.2	12.5	S
Sugar AXG	PS-DVB	10	6	Trimethyl-amino	HBO — 3	ND	>0.2	12.5	S
SAX	PS-DVB	5	6	Trimethyl-amino	Cl —	ND	>1.0	12.5	S
TSKgel	Matrix *	Particle size (µm)	Pore size (µm)	Functional group	Counter ion	Excl. limit, PEG ** (Da)	Capacity (mg BSA/mL)	Small ion capacity meq/mL	pKa	Column hard-ware ***
BioAssist Q	pMA	7, 13	130	Sulfopropyl	Na +	70 (1)	0.1	2.4	PEEK
SP-5PW	pMA	10, 13, 20	100	Sulfopropyl	Na +	1,000,000	40 (2)	>0.1	2.3	S,G
CM-5PW	pMA	10, 13	100	Carboxymethyl	Na +	1,0000,000	45 (2)	>0.1	4.2	S,G
SP-STAT	pMA	7, 10	Sulfopropyl	Na +	500	10 (3)	>0.023	2.6	S
CM-STAT	pMA	7, 10	Carboxymethyl	Na +	500	15 (3)	>0.1	4.9	S
SP-NPR	pMA	2.5	Sulfopropyl	Na +	500	5 (2)	>0.1	2.3	S
SP-2SW	Silica	5	12.5	Sulfopropyl	Na +	10,000	ND	0.3	2.2	S
CM-2SW	Silica	5	12.5	Carboxymethyl	Na +	10,000	110 (2)	>0.3	4.2	S
CM-3SW	Silica	10	23	Carboxymethyl	Na +	30,000	ND	>0.3	4.2	S
SCX	PS-DVB	5	6	Sulfonic acid	Na + , H +	ND	>1.5	S

Аминокислоты, пептиды и белки

ТИП ОБРАЗЦА	Диапазон ММ (DA)	КОЛОНКА TSKgel	Диапазон pH
Аминокислоты	10,000 до 5,000,000	BioAssist S	2.0 — 12.0
		BioAssist Q	2.0 — 12.0
Q-STAT	3.0 — 10.0
SP-5PW	2.0 — 12.0
DEAE-5PW	2.0 — 12.0
CM-5PW	2.0 — 12.0
SP-STAT	3.0 — 10.0
CM-STAT	3.0 — 10.0
SP-NPR	2.0 — 12.0
DEAE-NPR	2.0 — 12.0
SuperQ-5PW	2.0 — 12.0
Нуклеиновые кислоты
Пурины и пиримидины	DEAE-2SW	2.0 — 7.5
	SP-2SW	2.0 — 7.5
Нуклеозиды	SP-2SW	2.0 — 7.5
	DEAE-2SW	2.0 — 7.5
Нуклеотиды	Q-/DNA-STAT	3.0 — 10.0
	DEAE-2SW	2.0 — 7.5
Олигонуклеотиды	Q-/DNA-STAT	3.0 — 10.5
	DEAE-5PW	2.0 — 12.0
	DEAE-NPR	2.0 — 12.0
	DNA-NPR	2.0 — 12.0
	SuperQ-5PW	2.0 — 12.0
ДНК, РНК и продукты ПЦР	Q-/DNA-STAT	3.0 — 10.0
	DNA-NPR	2.0 — 12.0
	DEAE-NPR	2.0 — 12.0
	DEAE-5PW	2.0 — 12.0
	DEAE-3SW	2.0 — 7.5
Другие молекулы
Моно и дисахариды	Sugar AXI, AXG	1.0 — 14.0
	SCX	1.0 — 14.0
	SAX	1.0 — 14.0

ИОХ — СЕРИЯ КОЛОНОК TSKgel STAT

Колонки TSKgel STAT предназначены для высокоэффективного разделения биомолекул и низкомолекулярных соединений. Они обеспечивают превосходное разрешение при меньшем времени анализа. Колонки STAT доступны с различными размерами и частицами (5, 7, 10 мкм), что соответствует большинству применений.

Поверхность гидрофильных непористых частиц покрыта плотной сетью многослойных ионообменных групп (карбоксиметильная, сульфопропильная или четвертичная аммониевая группы; см. Рис. 3). Инновационная химия привитых групп сорбентов дает приемлемую емкость по образцам, тогда как традиционные непористые смолы обычно показывают ограниченную емкость из-за меньшей площади поверхности.

Для быстрого и сверхбыстрого анализа методом ИОХ, короткие колонки (внутренний диаметр 3 мм х 3,5 см длина) заполнены крупными частицами размером 10 мкм. Они идеально подходят для быстрого подбора колонок или мониторинга процесса. Более длинные колонки (с мм и длиной 10 см), заполненные частицами размером 7 мкм, разработаны для разделения методом ИОХ с высоким разрешением. Они идеально подходят для анализа нуклеиновых кислот, различных mAb, белковых агрегатов или пегилированных белков. Колонки DNA-STAT (длина 4,6 мм, длина 10 см), упакованные анионообменной смолой Q-типа 5 мкм, оптимизированы для анализа нуклеиновых кислот.

Относительно большие размеры частиц обеспечивают быстрое разделение при умеренном давлении, патентованная технология модификации поверхности обеспечивает высокую плотность функциональных групп наряду с высокой емкостью по образцу.

ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ TSKgel STAT СЕРИИ

• Стала возможной высоко эффективная хроматография для аналитов как с высокой так и с низкой молекулярной массой, благодаря новейшим технологиям прививки фаз и отсутствию микропор
• Высокая скорость и высокое разрешение при анализе биомолекул в ВЭЖХ и ультра-ВЭЖХ
• Более высокая адсорбция и низкие давления по сравнению с колонками TSKgel NPR с меньшим размером частиц
• 7 или 10 мкм частицы (TSKgel Q-STAT) и 5 мкм частицы (TSKgel DNA-STAT)
• 7 или 10 мкм частицы для SP и CM

ПРИМЕРЫ С АНИОНООБМЕННЫМИ КОЛОНКАМИ TSKgel STAT

Нуклеотиды

Моно-, ди- и тринуклеотиды были разделены с прекрасными формами пиков на колонке TSKgel DNA-STAT. Узкие симметричные пики, как показано на рисунке, демонстрируют отсутствие микропор в этом новом поколении колонок из непористой смолы. Колонки TSKgel DNA-STAT также, как следует из названия, являются лучшим выбором для больших фрагментов нуклеиновых кислот.

ПРИМЕРЫ С АНИОНООБМЕННЫМИ КОЛОКАМИ TSKgel STAT

Моноклональные антитела

Моноклональное антитело расщепляли с использованием пепсина и разделяли на колонке TSKgel Q-STAT, а также на непористой колонке WAX конкурирующего производителя Как показано на рис, три пика были выделены из колонки TSKgel Q-STAT и определены как F (ab ‘) 2, pFc и интактный IgG с помощью ДНС-ПААГ. Не было никакой корреляции между пиками, полученными на колонке WAX и ДНС-ПААГ.

Высокое разрешение и высокая производительность анализа нуклеотидов

Разделение нуклеотидов на колонке Q-STAT длиной 10 см сравнивали с разделением на колонке длиной 3,5 см. Хотя более длинная колонка обеспечивает разделение нуклеотидов с высоким разрешением в течение пяти минут, тот же образец можно анализировать в течение одной минуты на более короткой колонке, что обеспечивает высокую производительность.

ПРИМЕРЫ С КАТИОНООБМЕННЫМИ КОЛОНКАМИ TSKgel STAT

Быстрые разделения

Быстрое разделение стандартов белка исследовали с использованием коротких катионообменных колонок. Колонка TSKgel SP-STAT показывает лучшее разрешение форму пика, время анализа меньше ( * Емкость определялась на высоте ниже 10% точки проскока; УФ 280 нм.

ПРИМЕРЫ С КАТИОНОБМЕННЫМИ КОЛОНКАМИ TSKgel BioAssist

Анализ бромелайна на колонках TSKgel BioAssist S и колонке S другого производителя

На рисунке ниже (слева) показан анализ бромелайна, протеолитического фермента, который используется в качестве пищевой добавки. Бромелайн является основным гликопротеином с молекулярной массой 33 кДа и pI 9,55.

Анализ имуноглобуллина IgM

Известно, что IgM обладает уникальными и полезными характеристиками по сравнению с другими классами иммуноглобулинов; это большая молекула, состоящая из пяти субъединиц IgG, в результате чего получается относительно нестабильный и трудноочищаемый белок. В отличие от одноцепочечных антител, IgM не может быть очищен с помощью Protein А (аффинный сорбент, используемый из-за высокой способности связывания и отличной селективности к антителам) из-за стерического барьера. Альтернативные методы аффинной хроматографии разработали с тиофильными сорбентами, но эти методы часто дают низкую емкость. Был разработан альтернативный метод очистки IgM ионообменной хроматографией с использованием колонки TSKgel BioAssist S. На Рис ниже (справа) показано отделение IgM от примесей с использованием ступенчатого градиента NaCl 0,3 моль / л после элюирования альбумина.

ИОХ — СЕРИЯ TSKgel 5PW

Сорбенты G5000 PW серии TSKgel 5PW представляют собой сферические частицы со средним размером пор 100 нанометров. Состав функциональных групп DEAE, SP и CM дает стандартные ионообменники, в то время как полиаминовые прививаемые группы, используемые при производстве TSKgel SuperQ-5PW, дает сильный анионообменник с более высокой емкостью. Благодаря более высокой плотности привитых анионообменных групп TSKgel SuperQ-5PW имеет меньший эффективный размер пор и более высокую динамическую емкость, чем TSKgel DEAE-5PW.

ПРИМЕРЫ ПРИМЕНЕНИЙ НЕНИЕ С АНИОНОБМЕННЫМИ КОЛОНКАМИ TSKgel 5PW

Анализ синтетического олигонуклеотида на TSKgel SuperQ-5PW

На рис. ниже (слева) показан анализ 16-мерного олигонуклеотида морфолина на колонке TSKgel SuperQ-5PW с использованием градиента NaCl в подвижной фазе гидроксида натрия 10 ммоль/ л.

Анализ РНК с высокой молекулярной массой на TSKgel DEAE-5PW

Рис.ниже (справа) показывает фракционирование высокомолекулярной РНК E.coli на TSKgel DEAE-5PW, большие 100 нм поры этой смолы делают разделение более эффективным.

ПРИМЕРЫ С КАТИОНООБМЕННЫМИ КОЛОНКАМИ TSKgel 5PW

Сравнение сильных и слабых катионитов

Различия в селективности между сильными (TSKgel SP-5PW) и слабыми (TSKgel CM-5PW) катионообменниками продемонстрированы на рис. ниже (слева) па примере разделения глобулярных белков.

Полупрепаративная очистка липоксидазы

Очистка 200 мг сырья липоксидазы на колонке TSKgel SP-5PW с внутренним диаметром 21,5 мм показана на рис.ниже (справа). Масштабирование упрощается, т к изменяется только размер частиц от 10 мкм (внутренний диаметр 7,5 мм) до 13 мкм (ID 21,5 мм) или 20 мкм (ID 55 мм).

ИОХ — СЕРИЯ TSKgel NPR

Колонки TSKgel DEAE-NPR, DNA-NPR и SP-NPR упакованы частицами размером 2,5 мкм. Высокая эффективность колонки и низкая загрузка по образцу ограничивает применение этих колонок для быстрого анализа и микромасштабной препаративной очистки.

Колонка DNA-NPR более длинной версия колонки DEAE-NPR, которая позволяет улучшить разделение олигонуклеотидов, в том числе амплифицированных методом ПЦР. Для защиты колонок DNA-NPR и DEAE-NPR доступны предколонки.

ПРИМЕРЫ ПРИМЕНЕНИЙ НА ИОНООБМЕННЫХ КОЛОНКАХ TSKgel NPR

Аниообменники TSKgel DEAE-NPR и DNA-NPR

Из-за маленького размера частиц колонки из непористой смолы (TSKge NPR) идеальны для быстрого разделения больших биомолекул, таких как расщепление ДНК. Хроматограмма стандартного расщепления Hae III ДНК pBR322 на TSKgel DEAE-NPR, с предколонкой, показана на рисунке ниже ((слева).

Для достижения лучшего разрешения при анализе ПЦР фрагментов, рекомендуется использовать колонки TSKgel DNA-NPR, которые имеют длину 7,5 см и ID 4,6 мм, что обеспечивает более высокую эффективность на более длинных колонках.

Катионообменник TSKgel SP-NPR

Колонки TSKgel SP-NPR обеспечивают быстрое разделение благодаря своим небольшим сферическим частицам. Проверка чистоты адено-ассоциированного вируса, (AAV) обычно используемого в исследованиях генной терапии, на колонке TSKgel SP-NPR показана на рис. ниже (справа) Этот 10-минутный метод ВЭЖХ заменяет существующий анализ, который занимал два дня.

ИОХ — СЕРИЯ TSKgel SW

Ионообменные колонки на основе силикагеля обычно используются для разделения низкомолекулярных соединений, таких как фармацевтические препараты, нуклеотиды или небольшие пептиды. Частицы на основе силикагеля используются с размерами пор 125 нанометров (2SW) и 250 нанометров (3SW) с функциональностью либо диэтиламиноэтил (DEAE), либо карбоксиметил (CM). Динамическая емкость для белков малого и среднего размера на TSKgel DEAE-3SW примерно в два раза выше, чем у DEAE-5PW, из-за меньшего размера пор и большей площади поверхности.

Повышенная растворимость силикагеля при pH выше 7,5 ограничивает использование ионообменных колонок на его основе для кислотных или нейтральных подвижных фаз.

ПРИМЕНЕНИЕ ИОНООБМЕННЫХ КОЛОНОК TSKgel SW

Анионообменные колонки на основе силикагеля

Колонки TSKgel типа 2SW обеспечивают высокоэффективное разделение ионных аналитов небольшого размера. Анализы высокого разрешения мелких анионных частиц лучше всего проводить на анионитах на основе силикагеля с мелкими порами, таких как TSKgel DEAE-2SW. Это показано на рис.ниже (слева). Колонка TSKgel DEAE-3SW с размером пор 250 нм используется для разделения пептидов, белков с низкой молекулярной массой и фрагментов ДНК.

Катионообменные колонки на основе силикагеля

Катионообменники на основе силикагеля обычно используются для разделения низкомолекулярных соединений, таких как фармацевтические препараты, нуклеотиды, катехоламины и небольшие пептиды. Например, на рисунке ниже (справа) показано разделение нуклеозидов на TSKgel SP-2SW.

Источник